本篇文章給大家談?wù)劯锾m染色步驟，以及革蘭氏染色四種染液對應(yīng)的知識點，希望對各位有所幫助，不要忘了收藏本站喔。

革蘭染色的關(guān)鍵步驟是什么

脫色時間的掌握，是革蘭染色成敗的關(guān)鍵。

革蘭氏染色四大基本步驟：結(jié)晶紫初染、碘液媒染、乙醇脫色、沙黃復(fù)染，其中乙醇脫色是關(guān)鍵。因為如果脫色過度，有可能會使革蘭氏陽性菌呈假陰性，如果脫色不夠，有可能使革蘭氏陰性菌呈假陽性。

革蘭氏染色是細(xì)菌學(xué)中廣泛使用的一種鑒別染色法，通過結(jié)晶紫初染和碘液媒染后，在細(xì)胞壁內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物，革蘭氏陽性菌由于其細(xì)胞壁較厚、肽聚糖網(wǎng)層次較多且交聯(lián)致密，革蘭氏染色屬復(fù)染法，即將標(biāo)本固定后，先用龍膽紫染色，加碘液媒染后用酒精脫色，再用蕃紅復(fù)染。

拓展資料：

革蘭染色法，由丹麥病理學(xué)家Christain Gram于1884年創(chuàng)立，是細(xì)菌學(xué)中很重要的鑒別染色法，因為通過此法染色，可將細(xì)菌鑒別為革蘭陽性菌（G+）和革蘭陰性菌（G-）兩大類。

如果將細(xì)菌做革蘭染色，凡是染后菌體呈藍(lán)紫色的，稱為“革蘭陽性菌”；菌體是伊紅色，稱“革蘭陰性菌”。無論陽性菌還是陰性菌，都有桿菌和球菌。

葡萄球菌、大腸桿菌、銅綠假單胞菌是臨床最為常見的病原菌，葡萄球菌屬于革蘭陽性菌，大腸桿菌屬于革蘭陰性菌中的腸桿菌科，除大腸桿菌以外，臨床較常見的腸桿菌科細(xì)菌還有變形桿菌屬，沙門菌屬、克霉白菌屬；銅綠假單胞菌是臨床常見的較耐藥革蘭陰性桿菌。

參考資料：革蘭染色_百度百科

革蘭氏染色的步驟和原理

革蘭氏染色的步驟和原理如下:

步驟:

1、首先在載玻片上滴一小滴蒸餾水，用灼燒過的接種針挑取少量細(xì)菌，置載玻片的水滴中與水混合并涂抹開，注意涂抹要均勻平坦，涂抹后直徑約為1 cm的薄層。

2、固定。將載玻片在火焰上方固定。

3、染色。加路哥式碘液大概一滴，作用1 min后用水沖洗，注意流水不要直接往薄層上沖，用過濾紙吸干。

4、脫色。用95%乙醇脫色，一般脫色時間大概為30 s。

5、觀察。

干燥后，用油鏡鏡檢觀察，并做好記錄。

原理：染色后細(xì)菌與環(huán)境形成鮮明對比，可以清楚地觀察到細(xì)菌的形態(tài)、排列及某些結(jié)構(gòu)特征，而用以分類鑒定。

革蘭染色在醫(yī)學(xué)上的重要意義:

1、鑒別細(xì)菌：用革蘭染色法可將所有細(xì)菌分成革蘭陽性菌及革蘭陰性菌兩大類，便于初步識別細(xì)菌。

2、選擇藥物：臨床上可很據(jù)病原菌的革蘭染色性，選擇有效的抗生素用于治療。

3、與致病性有關(guān)：有些革蘭陽性菌能產(chǎn)生外毒素，而革蘭陰性菌則主要具有內(nèi)毒素，兩者致病作用不同。

革蘭染色步驟正確順序

革蘭染色正確順序：1、涂片固定；2、草酸銨結(jié)晶紫染1分鐘；3、蒸餾水沖洗；4、加碘液覆蓋涂面，染約1分鐘；5、水洗，用吸水紙吸去水分；6、加95%酒精數(shù)滴，并輕輕搖動進(jìn)行脫色，20秒后水洗，吸去水分；7、蕃紅染色液（ 稀 ）染1分鐘后，蒸餾水沖洗；8、干燥，鏡檢。

革蘭染色步驟正確順序

革蘭氏染色是用來鑒別細(xì)菌的一種方法：這種染色法利用細(xì)菌細(xì)胞壁上的生物化學(xué)性質(zhì)不同，可將細(xì)菌分成兩類，即革蘭氏陽性與革蘭氏陰性。這一染色方法由丹麥醫(yī)生漢斯·克里斯蒂安·革蘭于1884年所發(fā)明，最初是用來鑒別肺炎球菌與克雷白氏肺炎菌之間的關(guān)系。

原理：通過結(jié)晶紫初染和碘液媒染后，在細(xì)胞壁內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物，革蘭氏陽性菌由于其細(xì)胞壁較厚、肽聚糖網(wǎng)層次較多且交聯(lián)致密，故遇乙醇或丙酮脫色處理時，因失水反而使網(wǎng)孔縮小，再加上它不含類脂，故乙醇處理不會出現(xiàn)縫隙，因此能把結(jié)晶紫與碘復(fù)合物牢牢留在壁內(nèi)，使其仍呈紫色。

而革蘭氏陰性菌因其細(xì)胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差，在遇脫色劑后，以類脂為主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋結(jié)晶紫與碘復(fù)合物的溶出，因此通過乙醇脫色后仍呈無色，再經(jīng)沙黃等紅色染料復(fù)染，就使革蘭氏陰性菌呈紅色。

革蘭氏染色步驟是什么？

革蘭氏染色法一般包括初染、媒染、脫色、復(fù)染等四個步驟，具體操作方法是：

1、涂片固定。

2、草酸銨結(jié)晶紫染1分鐘。

3、蒸餾水沖洗。

4、加碘液覆蓋涂面染約1分鐘。

5、水洗，用吸水紙吸去水分。

6、加95%酒精數(shù)滴，并輕輕搖動進(jìn)行脫色，20秒后水洗，吸去水分。

7、蕃紅染色液（稀）染1分鐘后，蒸餾水沖洗。干燥，鏡檢。

原理

通過結(jié)晶紫初染和碘液媒染后，在細(xì)胞壁內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物，革蘭氏陽性菌由于其細(xì)胞壁較厚、肽聚糖網(wǎng)層次較多且交聯(lián)致密，故遇乙醇或丙酮脫色處理時，因失水反而使網(wǎng)孔縮小，再加上它不含類脂，故乙醇處理不會出現(xiàn)縫隙；

因此能把結(jié)晶紫與碘復(fù)合物牢牢留在壁內(nèi)，使其仍呈紫色；而革蘭氏陰性菌因其細(xì)胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差，在遇脫色劑后，以類脂為主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋結(jié)晶紫與碘復(fù)合物的溶出，因此通過乙醇脫色后仍呈無色，再經(jīng)沙黃等紅色染料復(fù)染，就使革蘭氏陰性菌呈紅色。

以上內(nèi)容參考：百度百科-革蘭氏染色

革蘭染色的實驗步驟

革蘭氏染色法一般包括初染、媒染、脫色、復(fù)染等四個步驟，具體操作方法是：

1、涂片固定。

2、草酸銨結(jié)晶紫染1分鐘。

3、蒸餾水沖洗。

4、加碘液覆蓋涂面染約1分鐘。

5、水洗，用吸水紙吸去水分。

6、加95%酒精數(shù)滴，并輕輕搖動進(jìn)行脫色，20秒后水洗，吸去水分。

7、蕃紅染色液（?。┤?分鐘后，蒸餾水沖洗。干燥，鏡檢。

擴(kuò)展資料：

革蘭染色反應(yīng)的原理：

革蘭染色反應(yīng)是細(xì)菌分類和鑒定的重要性狀。它是1884年由丹麥醫(yī)師Gram創(chuàng)立的。

革蘭染色法（Gram stain）不僅能觀察到細(xì)菌的形態(tài)，而且還可將所有細(xì)菌區(qū)分為兩大類：染色反應(yīng)呈藍(lán)紫色的稱為革蘭氏陽性細(xì)菌，用G+表示；染色反應(yīng)呈紅色（復(fù)染顏色）的稱為革蘭氏陰性細(xì)菌，用G-表示。

細(xì)菌對革蘭氏染色的不同反應(yīng)，是由于它們細(xì)胞壁的成分和結(jié)構(gòu)不同而造成的。

革蘭氏陽性細(xì)菌的細(xì)胞壁主要是由肽聚糖形成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)組成的，在染色過程中，當(dāng)用乙醇處理時，由于脫水而引起網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)中的孔徑變小，通透性降低，使結(jié)晶紫-碘復(fù)合物被保留在細(xì)胞內(nèi)而不易脫色，因此，呈現(xiàn)藍(lán)紫色。

革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁中肽聚糖含量低，而脂類物質(zhì)含量高，當(dāng)用乙醇處理時，脂類物質(zhì)溶解，細(xì)胞壁的通透性增加，使結(jié)晶紫-碘復(fù)合物易被乙醇抽出而脫色，然后又被染上了復(fù)染液（番紅）的顏色，因此呈現(xiàn)紅色。